La stabilità e la persistenza dell’infezione del coronavirus SARS-CoV-2 è stata studiata su diverse superfici, ma esistono scarsi dati relativi ai dispositivi di protezione individuale (DPI), peraltro utilizzando cariche virali realistiche per l’infezione.

Data l’importanza di un’adeguata gestione dei DPI per evitare il rischio di infezione da virus, la stabilità dell’RNA è stata valutata sui DPI.
 
Il team di studio si è concentrato sulla persistenza dell’infezione da SARS-CoV-2 e sul rilevamento dell’RNA genomico nei DPI (camici e mascherine) che sono stati determinati rispettivamente da saggi in vitro e RT-qPCR.

I campioni sono stati infettati con un campione clinico positivo per SARS-CoV-2 (Clin-Inf) e con un campione di ceppo SARS-CoV-2 inattivato al calore (Str-Inf) come controllo.
 
In modo allarmante, i risultati dello studio hanno mostrato che i campioni di DPI infettati da Clin-Inf erano positivi per i 3 geni virali (N, S e ORF1ab) sui camici fino a 5 giorni dopo l’infezione, mentre questi geni complessivi sono stati rilevati fino a 30 giorni nel caso di mascherine.
 
Tuttavia, i campioni di camici e maschere FFP2 contaminati con Clin-Inf hanno mostrato un effetto citopatico sulle cellule VERO fino a 5-7 giorni dopo l’infezione.
 
I risultati dello studio hanno mostrato che l’RNA SARS-CoV-2 è stato rilevato su diversi materiali DPI per 5-30 giorni, ma i DPI contaminati dal virus erano infettivi fino a 5-7 giorni.
 
I risultati dello studio dimostrano la necessità di migliorare la gestione dei DPI e di formulare strategie per introdurre composti viricidi nei tessuti DPI.
 
I risultati dello studio sono stati pubblicati sulla rivista peer reviewed: BMC Infectious Diseases. https://bmcinfectdis.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12879-021-06861-7

I dati dei test in vitro supportano che i materiali DPI (camici e maschere) infettati da un campione clinico positivo per SARS-CoV-2 hanno mantenuto la sua infettività fino a 5-7 giorni dopo l’infezione. Ciò è conforme ai 7 giorni precedentemente descritti per le mascherine chirurgiche e potrebbe avere implicazioni pratiche. https://www.thelancet.com/journals/lanmic/article/PIIS2666-5247(20)30003-3/fulltext

Discussione

In questo studio sono state valutate la persistenza dell’infezione da SARS-CoV-2 e il rilevamento dell’RNA genomico di SARS-CoV-2 su DPI come camici e mascherine.

I dati dei nostri test in vitro supportano che i materiali DPI (abiti e maschere) infettati da un campione clinico positivo per SARS-CoV-2 hanno mantenuto la sua infettività fino a 5-7 giorni dopo l’infezione. Ciò è conforme ai 7 giorni precedentemente descritti per le maschere chirurgiche [7] e potrebbe avere implicazioni pratiche.

D’altra parte, abbiamo rilevato geni virali in diversi tipi di DPI fino a 5 giorni dopo l’infezione virale e in alcuni casi l’RNA virale è stato rilevato dopo 30 giorni (Tabella 2).

Inoltre, i campioni di camice hanno prodotto una sopravvivenza del virus inferiore poiché i 3 geni virali sono stati rilevati fino a 5 giorni in entrambi i tipi di infezione, con l’RNA genomico del ceppo virale inattivato al calore o con il campione clinico positivo per SARS-CoV-2.

Nel caso delle mascherine, la stabilità dell’RNA virale è stata dimostrata fino a 15 giorni nel caso del controllo del ceppo virale dell’RNA genomico e fino a 30 giorni se infettato con il campione clinico positivo per SARS-CoV-2.

È già stato segnalato che SARS-CoV-2 persiste su diverse superfici per diversi giorni [4, 8, 9]. Il limite della maggior parte di questi studi è che le infezioni da virus sono state eseguite con cariche virali elevate che ricordano scenari irrealistici [10]. In questo studio, abbiamo utilizzato una carica virale corrispondente a una situazione più realistica, utilizzando un campione rinofaringeo umano positivo per SARS-CoV-2 per infettare diversi campioni di DPI.

La carica virale di SARS-CoV-2 precedentemente segnalata nei campioni clinici variava da una mediana di 7,99 × 10 ⁴  copie per ml nei campioni di gola e 7,52 × 10 ⁵  nei campioni di espettorato dopo l’insorgenza a valori complessivamente più elevati > 1 × 10 ⁶  copie per ml della carica virale subito dopo l’insorgenza [11].

Pertanto, per quantificare con precisione il numero di copie virali atteso di un campione clinico, è necessario stabilire una curva standard affidabile e robusta. Nel nostro studio, un campione nasofaringeo è stato quantificato mediante qPCR utilizzando una curva standard affidabile eseguita con un materiale di riferimento appropriato. Dai dati risultanti, abbiamo deciso di utilizzare una concentrazione di carica virale entro intervalli approssimativi (10 ⁴  copie virali) per infettare campioni di DPI cercando di assomigliare a una situazione reale.

Le differenze osservate tra la persistenza del rilevamento virale durante l’infezione con un campione clinico positivo SARS-CoV-2 (Clin-Inf) o RNA virale da un ceppo SARS-CoV-2 inattivato al calore (Str-Inf) utilizzato come controllo, sono coerenti con la loro diversa natura.

Il virus contenuto nelle cellule nasofaringee presenta il suo capside protettivo che conserva il suo materiale genomico per un periodo più lungo, come è stato osservato nel nostro studio. Mentre il capside del ceppo commerciale inattivato dal calore presenta alterazioni funzionali e strutturali che rendono il virus non infettivo ma più labile. La persistenza del virus è stata determinata dalla rilevazione dell’RNA virale in diversi materiali DPI.

Infine, abbiamo potuto osservare che il materiale di composizione delle maschere facciali (tipo FPP2) sembra essere più adatto alla stabilità del virus probabilmente a causa della sua natura più porosa, rispetto al tessuto del camice [12]. I nostri risultati dimostrano che la vitalità infettiva del virus su diverse superfici non dovrebbe essere testata solo utilizzando tecniche molecolari, poiché i geni potrebbero essere rilevati più a lungo della vitalità infettiva virale.

Conclusioni

I materiali DPI contaminati da SARS-CoV-2 rimangono infettivi per 5-7 giorni. L’RNA genomico virale è stato rilevato in diversi materiali DPI per 5-30 giorni nel caso delle maschere facciali. Riteniamo che questi risultati dimostrino la necessità di migliorare la composizione del tessuto DPI e di valutare l’aggiunta di composti viricidi ad essi.

La gestione responsabile di questi DPI è fondamentale per evitare l’infezione da SARS-CoV-2 tramite il contatto di questi elementi anche molti giorni dopo la loro rimozione.

Tabella 2 Rilevamento del gene SARS-CoV-2 in campioni di DPI infetti da campione clinico umano positivo per SARS-CoV-2 (Clin-Inf)

Da: Persistenza dell’infezione da SARS-CoV-2 sui dispositivi di protezione individuale (DPI)

1. ^a Ct: soglia del ciclo in relazione al numero di cicli necessari affinché l’amplificazione marcata fluorescente attraversi la soglia nella reazione RT-qPCR. Valori di Ct più bassi indicano una carica virale più elevata. I valori Ct ≤ 37,0 sono stati considerati positivi